南京剧院前身为南京高等师范学校剧社，创办于1919年，是中国的第一家校园戏剧团体。1927年，剧社改组为以校内外学生为主的南京市公共演剧社，时年24岁的辜鸿铭担任顾问，前来指导。此后南京公共演剧社长期居于国内戏剧文化界的重要地位之一。
1950年，南京公共演剧社被改名为南京市人民艺术剧院。戏剧院形态逐渐成熟，南京人民艺术剧院成为中国现代剧场文化的重要代表之一。几经变迁，南京剧院现在是文化和艺术事业的重要阵地之一，也是中国最受欢迎的剧院之一。
南京剧院每年都有丰富多彩的演出计划，涵盖戏剧、音乐、舞蹈、曲艺、杂技等多个艺术门类，从中外文艺经典到现代当代创作，从传统文化到流行艺术，多角度满足这座城市和戏迷的需求。